آنتی بادی و انواع آن
آنتی بادی (Ab) ، همچنین به عنوان ایمونوگلوبولین (Ig) شناخته می شود، یک پروتئین Y شکل بزرگ است که توسط سیستم ایمنی بدن برای شناسایی و خنثی سازی اجسام خارجی مانند باکتری های بیماریزا و ویروس ها استفاده می شود. آنتی بادی یک مولکول منحصر به فرد از پاتوژن را به نام آنتی ژن تشخیص می دهد. هر نوک “Y” یک آنتی بادی حاوی پاراتوپ (مشابه قفل) است که مخصوص یک اپی توپ خاص (مشابه کلید) روی آنتی ژن است و به این دو ساختار اجازه می دهد با دقت به هم متصل شوند. با استفاده از این مکانیسم اتصال، آنتی بادی می تواند میکروب یا سلول آلوده را برای حمله به سایر قسمت های سیستم ایمنی بدن برچسب گذاری کند، یا می تواند آن را مستقیماً خنثی کند (به عنوان مثال ، با مسدود کردن بخشی از ویروس که برای حمله آن ضروری است).
برای اینکه سیستم ایمنی بتواند میلیون ها آنتی ژن مختلف را تشخیص دهد ، مکان های اتصال آنتی ژن در هر دو نوک آنتی بادی از تنوع یکسانی برخوردار است. در مقابل، باقی مانده آنتی بادی نسبتاً ثابت است. , فقط در چند نوع رخ می دهد، که کلاس یا ایزوتایپ آنتی بادی را مشخص می کند: IgA ، IgD ، IgE ، IgG یا IgM. منطقه ثابت در تنه آنتی بادیها شامل مکانهایی است که در تعامل با سایر اجزای سیستم ایمنی دخیل هستند. از این رو کلاس علاوه بر برخی ویژگی های ساختاری، عملکرد ایجاد شده توسط آنتی بادیها را پس از اتصال به آنتی ژن تعیین می کند.
آنتی بادیها می توانند انواع مختلفی داشته باشند که به عنوان ایزوتایپ یا کلاس شناخته می شوند. در پستانداران جفت دار پنج کلاس از آنتی بادیها وجود دارد که به عنوان IgA ، IgD ، IgE ، IgG و IgM شناخته می شوند، که بیشتر به زیر کلاسهایی مانند IgA1 ، IgA2 تقسیم می شوند. پیشوند “Ig” مخفف ایمونوگلوبولین است، در حالی که پسوند نوع زنجیره سنگین آن را نشان می دهد: انواع زنجیره سنگین α (آلفا) ، γ (گاما) ، δ (دلتا) ، ε (اپسیلون) ، μ (mu) باعث ایجاد IgA ، IgG ، IgD ، IgE ، IgM می شود. ویژگی های متمایز هر کلاس توسط بخشی از زنجیره سنگین در داخل لولا و منطقه Fc تعیین می شود.
این کلاسها از نظر خصوصیات بیولوژیکی، مکانهای عملکردی و توانایی مقابله با آنتی ژنهای مختلف، همانطور که در جدول نشان داده شده است، متفاوت هستند. به عنوان مثال، آنتی بادیهای IgE مسئول یک واکنش آلرژیک متشکل از ترشح هیستامین از ماست سل ها هستند که به آسم کمک می کند. ناحیه متغیر آنتی بادی به آنتی ژن آلرژیک متصل می شود، به عنوان مثال ذرات گرد و غبار، در حالی که منطقه Fc آن (در زنجیره های سنگین ε) به گیرنده Fc ε روی ماست سل متصل می شود و باعث دگرانولاسیون آن می شود: آزاد شدن مولکول های ذخیره شده در دانه های آن.
ایزوتایپ آنتی بادی سلول B در طی توسعه و فعال شدن سلول تغییر می کند. سلولهای B نابالغ، که هرگز در معرض آنتی ژن قرار نگرفته اند، فقط ایزوتایپ IgM را به صورت متصل به سطح سلول بیان می کنند. لنفوسیت B، در این فرم آماده پاسخ، به عنوان “لنفوسیت B naive” شناخته می شود. لنفوسیتnaive B بیانگر IgM و IgD سطحی است. بیان همزمان هر دو این ایزوتایپ های ایمونوگلوبولین سلول B را آماده می کند تا به آنتی ژن پاسخ دهد. فعال سازی سلول B به دنبال درگیری مولکول آنتی بادی متصل به سلول با یک آنتی ژن، باعث تقسیم و تمایز سلول به سلول تولید کننده آنتی بادی به نام سلول پلاسما می شود. در این فرم فعال شده، سلول B شروع به تولید آنتی بادی به شکل ترشحی می کند تا یک شکل غشایی. برخی از سلولهای دختری سلولهای B فعال شده تحت سوئیچینگ ایزوتایپ قرار می گیرند، مکانیسمی که باعث می شود تولید آنتی بادی از IgM یا IgD به ایزوتایپ های دیگر آنتی بادی، IgE ، IgA یا IgG تغییر کند، که نقش های تعیین شده ای در سیستم ایمنی بدن دارند.
| Antibody isotypes of mammals | ||
| Class | Subclasses | Description |
| IgA | 2 | Found in mucosal areas, such as the gut, respiratory tract and urogenital tract, and prevents colonization by pathogens. Also found in saliva, tears, and breast milk. |
| IgD | 1 | Functions mainly as an antigen receptor on B cells that have not been exposed to antigens.[27] It has been shown to activate basophils and mast cells to produce antimicrobial factors. |
| IgE | 1 | Binds to allergens and triggers histamine release from mast cells and basophils, and is involved in allergy. Also protects against parasitic worms. |
| IgG | 4 | In its four forms, provides the majority of antibody-based immunity against invading pathogens. The only antibody capable of crossing the placenta to give passive immunity to the fetus. |
| IgM | 1 | Expressed on the surface of B cells (monomer) and in a secreted form (pentamer) with very high avidity. Eliminates pathogens in the early stages of B cell-mediated (humoral) immunity before there is sufficient IgG. |
آنتی بادیهای اختصاصی با تزریق آنتی ژن به یک پستاندار مانند موش، رت، خرگوش، بز، گوسفند یا اسب برای مقادیر زیاد آنتی بادی تولید می شود. خون جدا شده از این حیوانات حاوی آنتی بادی های پلی کلونال است – آنتی بادیهای متعددی که به همان آنتی ژن متصل می شوند- در سرم، که اکنون می توان آن را آنتی سرم نامید. آنتی ژن ها نیز برای تولید آنتی بادیهای پلی کلونال در زرده تخم مرغ به مرغ ها تزریق می شوند. برای بدست آوردن آنتی بادی مخصوص یک اپی توپ یک آنتی ژن، لنفوسیت های ترشح کننده آنتی بادیها از حیوان جدا شده و با ترکیب آنها با یک رده سلول سرطانی نامیرا می شوند. سلولهای فیوزشده هیبریدوما نامیده می شوند و به طور مداوم در محیط رشد کرده و آنتی بادی ترشح می کنند. سلولهای هیبریدومای منفرد با شبیه سازی رقت جدا شده و کلونهای سلولی تولید می کنند که همگی آنتی بادی مشابه تولید می کنند. این آنتی بادیها مونوکلونال نامیده می شوند. آنتی بادیهای پلی کلونال و مونوکلونال اغلب با استفاده از پروتئین A / G یا کروماتوگرافی میل ترکیبی آنتی ژن خالص می شوند.
در تحقیقات، از آنتی بادیهای خالص در بسیاری از فعالیت ها استفاده می شود. آنتی بادی برای کاربردهای تحقیقاتی را می توان مستقیماً از طریق تأمین کنندگان آنتی بادیها یا با استفاده از موتور جستجوی تخصصی یافت. از آنتی بادی های تحقیقاتی معمولاً برای شناسایی و مکان یابی پروتئین های داخل سلول و خارج سلولی استفاده می شود. از آنتی بادیها در فلوسیتومتری برای افتراق انواع سلول ها توسط پروتئین هایی که بیان می کنند استفاده می شود. آنها همچنین درتست های ایمنی رسوبی برای جداسازی پروتئین ها و هر چیزی که به آنها متصل می شود (رسوب همزمان) از مولکول های دیگر در محلول سلول، در تجزیه و تحلیل وسترن بلات برای شناسایی پروتئین های جدا شده توسط الکتروفورز، و در ایمونوهیستوشیمی یا ایمونوفلورسانس استفاده می شود. پروتئین ها همچنین می توانند با استفاده از تکنیک های ELISA و ELISpot با آنتی بادی شناسایی و کمی شوند.
آنتی بادیهای مورد استفاده در تحقیقات برخی از قدرتمندترین و در عین حال مشکل سازترین معرف ها با عوامل عظیمی هستند که باید در هر آزمایشی کنترل شود از جمله واکنش متقاطع ، یا آنتی بادی که چندین اپیتوپ و میل را تشخیص می دهد، که بسته به شرایط آزمایشگاهی بسیار متفاوت است به عنوان مثال pH، حلال، حالت بافتی و غیره. محققانی که از آنتی بادی ها در کار خود استفاده می کنند، باید آنها را به درستی نگهداری کنند تا اجازه دهند تحقیقات آنها قابل تکرار باشد. کمتر از نیمی از آنتی بادیهای تحقیقاتی که در مقالات دانشگاهی ارجاع شده اند به راحتی قابل شناسایی هستند.
- آنتی بادی های پلی کلونال
آنتی بادیهای پلی کلونال ترکیبی ناهمگن از آنتی بادیها هستند که از پاسخ ایمنی سلول های B متعدد بدست می آیند و هر کدام یک اپی توپ متفاوت را روی همان آنتی ژن تشخیص می دهند.
از آنجا که آنتی بادیهای پلی کلونال از مخلوطی از آنتی بادیها تشکیل شده اند که پاسخ ایمنی طبیعی به یک آنتی ژن را نشان می دهند، در مقایسه با آنتی بادیهای مونوکلونال مستعد خطر بیشتری برای تغییر و تنوع در هر batch هستند.
- آنتی بادی های مونوکلونال
آنتی بادیهای مونوکلونال از یک کلون والد منفرد سلول B حاصل می شوند و بنابراین فقط یک اپی توپ را در هر آنتی ژن تشخیص می دهند. این سلولهای B توسط همجوشی با سلولهای هیبریدوما جاودانه می شوند و اجازه تولید طولانی مدت آنتی بادیهای مونوکلونال یکسان را می دهند.
از آنجا که آنتی بادیهای مونوکلونال به طور خاص یک اپی توپ خاص را بر روی آنتی ژن تشخیص می دهند، احتمال واکنش متقابل آنها با سایر پروتئین ها نسبت به آنتی بادی های پلی کلونال کمتر است.
- آنتی بادیهای نوترکیب
آنتی بادیهای مونوکلونال نوترکیب در شرایط in vitro با استفاده از ژن های مصنوعی تولید می شوند. توالی های رمزگذاری DNA را می توان با دقت کنترل کرد، امکان اتصال بهینه و بهبود قابلیت تولید بیشتر از آنتی بادیهای مونوکلونال تولید شده از هیبریدوما را فراهم می کند.
ابزار جستجوی آنتی بادی
ابزار جستجوی آنتی بادی Biocompare به شما اجازه می دهد تا بیش از 3 میلیون آنتی بادی از صدها تامین کننده آنتی بادی را به سرعت و به راحتی جستجو کنید. پایگاه داده آنتی-بادی را با استفاده از آنتی ژن هدف، واکنش گونه، میزبان، کونژوگه یا کاربرد، جستجو کنید. آنتی بادیهای شرکت های مختلف را در کنار هم مقایسه کنید و آنتی بادی را پیدا کنید که به بهترین وجهی با تحقیقات شما مطابقت دارد. جستجوهای خود را با استفاده از منوهای کشویی هدف قرار دهید تا فعالیت های مجدد، گونه های میزبان، برنامه ها و ترکیبات را پیدا کنید. برای هدف قرار دادن بیشتر جستجوهای خود از گزینه “antigen” استفاده کنید (گزینه پیش فرض “keyword” است) که به طور خاص نتایج شما را به آنتی بادیهایی که دارای زمینه های آنتی ژن منطبق هستند محدود می کند. از اینجا وارد شوید.
لینک های مفید:
- ابزار جستجوی آنتی بادیBiocompare
- واژه نامه آنتی بادیها
- آنتی بادی مونوکلونال و گلی کلونال
- مشاهده انواع آنتی بادی ها
- چگونه آنتی بادی اولیه یا ثانویه مناسب برای آزمایشات خود پیدا کنیم
- ده نکته برای اجرای بهتر تکنیک الایزا
اولین دیدگاه را ثبت کنید