محلول برادفورد (Bradford) یک لیتری، برای اندازه گیری پروتئین به روش فوتومتری، محصول کیازیست

محلول برادفورد (Bradford) یک لیتری، برای اندازه گیری پروتئین به روش فوتومتری، محصول کیازیست

محلول برادفورد (Bradford) برای اندازه گیری پروتئین به روش برادفورد کاربرد دارد. این محلول توسط تکنیک های فوتومتری در حضور پروتئین واکنش داده و رنگ خاکستری-قهوه ای آن به آبی تیره متمایل می گردد. این تغییر رنگ موجب افزایش جذب نوری در طول موج 595 نانومتر می گردد که قابل اندازه گیریست.

برای رسم منحنی استاندارد در این روش می توان از پروتئین خالص مانند آلبومین سرم گاوی (BSA) و یا ترانسفرین استفاده کرد.

خصوصیات محلول برادفورد (Bradford) برای اندازه گیری پروتئین به روش فوتومتری، محصول کیازیست

• محلول در مواجهه با نور و هوا ناپایدار هستند.
• در دمای اتاق ناپایدار می باشد.
• در دمای 4 درجه و به دور از نور تا یک سال پایدار است.

نحوه استفاده محلول برادفورد (Bradford) برای اندازه گیری پروتئین به روش فوتومتری، محصول کیازیست

برای استفاده به روش اسپکتروفوتومتری به روش micro  در طیف نمونه های 100-500 μg/mL
– در این روش حجم نهایی در کووت 1 میلی لیتر می باشد.
– پس از تمیز کردن کووت پلاستیکی یا شیشه ای، 990 میکرولیتر ازBradford Reagent را در کووت ریخته، سپس به آن 10 میکرولیتر از نمونه اضافه کرده و هم میزنیم.
– در دمای اتاق 5 دقیقه انکوبه کرده و سپس جذب را طول موج 595 نانومتر می خوانیم.
– منحنی استاندارد توسط رقت های مختلفBSA رسم می شود.
– منحنی توصیه شده در این روش می تواند از 100-500 μg/mL رسم شود.
– در صورت بالا رفتن جذب نمونه از بالاترین استاندارد نمونه را رقیق کنید تا در محدوده استاندارد قرار گیرد.

لینک های مفید:

– ساخت محلول برادفورد

– روش رسم نمودار استاندارد