نقد و بررسی
محیط PDA یا پوتیتو دکستروز آگار (Potato Dextrose Agar) پودری، ایبرسکومحیط کشت میکروبی POTATO DEXTROSE AGAR به صورت پودر، محصول ایبرسکو
کاربرد: کشت و شمارش مخمر و کپک در مواد غذایی
استاندارد: APHA, BAM, EP, JP
آماده سازی محیط:
- 39 گرم از محیط را در 1 لیتر آب مقطر حل کنید.
- بجوشانید تا کاملاً حل شود.
- در دمای 121 درجه به مدت 15 دقیقه اتوکلاو کنید.
- در صورتی که pH اسیدی برابر با 3.5 مورد نظر است، پس از خنک شدن محیط حدود 10 الی 15 میلی لیتر محلول تارتاریک اسید 10% به یک لیتر از محیط کشت اضافه کنید.
- دقت داشته باشید که پس از افزودن اسید به محیط کشت، آن را حرارت ندهید. این کار باعث تجزیه آگار و از دست رفتن خاصیت ژله ای آن می شود.
ترکیبات (گرم در لیتر):
Potato infusion (infusion from 200 g potatoes) 4.0
Dextrose 20.0
Agar 15.0
pH نهایی محیط در 25 درجه = 0.2±5.6
فرآیند آزمایش:
1- یک میلی لیتر از نمونه را داخل پلیت کشت بریزید.
2- مقدار 15 الی 20 میلی لیتر از محیط کشت خنک شده 45 الی 50 درجه را به پلیت اضافه کنید.
3- پلیت را به آهستگی بچرخانید تا محیط و نمونه به خوبی با هم مخلوط شوند.
4- پلیت ها را در دمای 20 الی 25 درجه به مدت 3 الی 5 روز (برای قارچ ها در صورت لزوم تا 3 هفته) گرما گذاری کنید.
کنترل کیفی:
ظاهر محیط دهیدراته: کرم/زرد رنگ، پودری و یکنواخت
ظاهر محیط آماده: به رنگ کهربایی روشن و کمی کدر
نتیجه کشت باکتری پس از گرما گذاری در دمای 20 الی 25 درجه به مدت 3 الی 5 روز:
سوش استاندارد | ATCC | واکنش |
Candida albicans | 10231 | رشد خوب |
Aspergillus brasiliensis (niger) | 16404 | رشد |
Saccharomyces cerevisiae | 9763 | خوب |
نتیجه و تفسیر:
پس از دوره گرما گذاری، واکنش نمونه های مجهول را با سوش های استاندارد مقایسه کنید. در این محیط کشت، مخمرها کلنی های کرم رنگ مایل به سفید ایجاد می کنند و کپک ها، کلنی های رشته ای در رنگ های متفاوت تولید می کنند. تعداد کلنی ها را شمارش کرده و با احتساب ضریب رقت در نمونه (در صورت رقیق کردن نمونه) تعداد باکتری موجود در یک گرم یا یک میلی لیتر از نمونه را تخمین بزنید.
نکته:
پس از گرما گذاری، پلیت ها را از نظر موفولوژی کلنی ها بررسی کنید. دقت داشته باشید که محیط کشت Potato Dextrose Agar یک محیط افتراقی نیست، بنابراین برای شناسایی دقیق تر جنس و سویه میکروارگانیسم ها باید از بررسی های میکروسکوپی و آزمایش های بیو شیمیایی استفاده کرد.
شرایط نگهداری
پودر محیط، داخل قوطی کاملا در بسته و در دمای پایین تر از 30 درجه، و محیط آماده در دمای بین 2 تا 8 درجه نگهداری شود. بهترین زمان استفاده تا قبل از تاریخ انقضای درج شده بر روی برچسب محصول است.
هنوز بررسیای ثبت نشده است.