نقد و بررسی
محیط کشت سلول Alpha-MEM محصول کیازیست، تهیه شده از پودرهای شرکت Gibco
محیط کشت سلول Alpha-MEM کیازیست
محیط کشت سلول Alpha-MEM در واقع همان MEM ابداع شده توسط دکتر Eagle می باشد که دچار تغییرات گسترده شده و برای کشت سلول های ویژه اختصاصی گشته است. اصلاحات آلفا (Alpha Modifications) بر روی این محیط شامل موارد زیر می باشد:
- حذف اسیدهای آمینه غیرضروری
- حذف سدیم پییروات
- حذف تیوکتیک اسید
- حذف ویتامین های بیوتین، اسکوربیک اسید و B12
این محیط کشت به طور گسترده برای سلول های کراتینوسیت، ملانومای انسانی و استروسیت های رت استفاده شده است.
توضیحات
Minimal Essential Medium (MEM) یک محیط کشت سلولی مصنوعی است که توسط هری ایگل برای اولین بار در سال 1959 در Science منتشر شد و می تواند برای حفظ سلول ها در کشت بافت استفاده شود. این بر اساس 6 نمک و گلوکز توصیف شده در نمک های ارل در سال 1934 است:
(کلرید کلسیم ، کلرید پتاسیم ، سولفات منیزیم ، کلرید سدیم ، فسفات سدیم و بی کربنات سدیم) ، با 13 اسید آمینه ضروری و 8 ویتامین: تیامین (ویتامین B1 ) ، ریبوفلاوین (ویتامین B2) ، نیکوتین آمید (ویتامین B3) ، پانتوتنیک اسید (ویتامین B5) ، پیرودوکسین (ویتامین B6) ، اسید فولیک (ویتامین B9) ، کولین و میو اینوزیتول (که در اصل به عنوان ویتامین B8 شناخته می شد).
انواع زیادی از این محیط ایجاد شده است ، بیشتر ویتامین های اضافی ، اسیدهای آمینه و/یا سایر مواد مغذی اضافه شده است.
ارل “محیط ارل متوسط پایه” (BME) خود را در سالهای 1955-1957 بر روی سلولهای L موش و سلولهای HeLa انسان ، با 13 اسید آمینه ضروری و 9 ویتامین اضافه شده توسعه داد.
BME حاوی بیوتین (ویتامین B7) است که بعداً ارل آن را زائد دانست. وی در سال 1959 “حداقل محیط ضروری” میزان آمینو اسیدها را دو برابر می کند تا “بیشتر با ترکیب پروتئینی سلولهای انسانی کشت شده مطابقت داشته باشد. این به محیط ها اجازه می دهد تا دوره های طولانی تری بدون تغذیه مجدد نگهداری شوند”.
DMEM (محیط ارل اصلاح شده دولبکو) در ابتدا به عنوان محیط ارل با “غلظت چهار برابر آمینو اسیدها و ویتامین ها” توسط Dulbecco و Vogt در سال 1959 منتشر شد.
α -MEM (حداقل ارل ضروری – اصلاح آلفا) یک محیط مبتنی بر MEM است که در سال 1971 توسط Clifford P. Stanners و همکارانش منتشر شد. در مقایسه با MEM ، حاوی اسیدهای آمینه غیر ضروری، پیروات سدیم و ویتامین ها (اسید اسکوربیک (ویتامین C)، بیوتین و سیانوکوبالامین) است. همچنین می تواند همراه با اسید لیپوئیک و نوکلئوزیدها باشد.
MEM گلاسکو (Glasgow Minimal Essential Medium) یک تغییر دیگر است که توسط lan MacPherson و Michael Stoker تهیه شده است.
شرایط تست های کیفی محیط کشت سلول Alpha-MEM کیازیست
- تست اندوتوکسین این محصول توسط Limulus amebocyte lysate (LAL) انجام شده است.
- تست میکروبی توسط تکنیک PCR و با اندازه گیری 16s rRNA انجام می شود.
- جهت تست سالم بودن محیط، سلول های بنیادی مزانشیمال انسانی در محیط حاوی (KFBS100) 10% FBS و 1% Pen Strep (KPS100)به آدیپوسیت تمایز داده شدند.
کنترل کیفی شما و نحوه نگهداری محیط کشت سلول Alpha-MEM کیازیست
رنگ محیط کشت در pH نرمال (7.2-7.4) قرمز روشن و شفاف میباشد. در دمای 4 درجه سانتی گراد هیچگونه رسوب و یا ذرات معلق دیده نمی شود.
- نگهداری: 2 تا 8 درجه سانتی گراد بدور از نور
- زمان ماندگاری: 12 ماه از تاریخ تولید
- نحوه حمل: در دمای محیط و بدور از نور
لینک های مفید
0دیدگاه