ترایزول 25ml محصول سیناکلون به نام RNX-Plus

ترایزول 25ml محصول سیناکلون با نام RNX-Plus

محلول حاوی phenol / Guanidine برای استخراج RNA total از نمونه های مختلف است.

• برداشت بافت

نخستین مرحله از استخراج RNA است که طی آن بافت مرود نظر از میان مجموعه بافتی بدن جدا می‌شود که برای این منظور می‌توان از پروتئازها استفاده نمود. گاهی نیز در محیط آزمایشگاه بافت‌ های آماده در ته فلاسک وجود دارند که برای جدا کردن آن ها ازتریپسین و EDTA استفاده می‌شود.

• همگن سازی

در دومین گام باید RNA و دیگر اجزای سلولی را از محاصره غشایی خارج نموده که بدین منظور باید مجموعه سلولی را تخریب کرده و ترکیبی همگن بدست آورد. RNX-Plus یا به عبارتی دیگر Trizol در این مرحله مورد استفاده قرار می‌گیرند.

• جداسازی فازها

در این مرحله RNA را از DNA و پروتئین‌ های سلولی جدا می‌ نمایند. پس از اضافه نمودن کلروفرم به نمونه آن را تحت شرایط ویژه‌ ای سانتریفیوژ کرده که در پایان سه فاز تفکیک شده را حاصل می‌نماید. فاز زیرین مربوط به پروتئین‌ها، فاز میانی مربوط به DNA و فاز رویین مربوط به RNA است.

• رسوب سازی RNA

در این مرحله پس از انتقال فاز رویی به لوله‌ای دیگر با استفاده از ایزوپروپانول و سپس سانترفیوژ RNA را رسوب می‌دهیم.

• شستشوی RNA

ششتشوی رسوب RNA با استفاده از اتانول ۷۵٪ گام پنجم را تشکیل می‌دهد. نکته: در استخراج DNA شستشو با الکل ۷۰٪ انجام می‌شود ولی در استخراج RNA با الکل ۷۵٪

• محلول سازی RNA[

انحلال رسوب RNA با استفاده از DEPC treated Water ششمین گام از استخراج RNA است.

• تجزیه و تحلیل RNA

آخرین گام سنجش صحت استخراج RNA است که از دو طریق اسپکتروسکوپی یا الکتروفورز، کمیت یا کیفیت کار مورد ارزیابی قرار می‌گیرد.

مشخصات کیت:

استفاده از نمک گوانیدیوم باعث رسوب همزمان DNA و پروتئین در فاز فنل می شود. فاز رویی شامل RNA با کیفیت بالا است.

کاربرد کیت:

استخراج total RNA