آشنایی با انواع روش های الایزا

روش ایمونوسوربنت مرتبط با آنزیم (ELISA) روشی است که به طور گسترده برای تشخیص و تعیین کمیت پروتئین ها، آنتی بادی ها و سایر مولکول ها در نمونه های بیولوژیکی استفاده می شود. انواع مختلفی از ELISA وجود دارد که متناسب با نیازها و کاربردهای مختلف تحقیقاتی توسعه یافته است. در این مقاله به برخی از رایج ترین روش های الایزا از جمله الایزای غیرمستقیم، الایزای ساندویچی، الایزای رقابتی و الایزای مستقیم می پردازیم.

الایزا غیرمستقیم

الایزای غیرمستقیم یکی از متداول ترین روش های الایزا است. در این روش آنتی ژن مورد نظر روی یک سطح جامد مانند صفحه میکروتیتر تثبیت می شود. سپس صفحه با یک آنتی بادی اولیه که به طور خاص به آنتی ژن متصل می شود، انکوبه می شود. پس از شستن هر گونه آنتی بادی غیر متصل، یک آنتی بادی ثانویه مرتبط با آنزیم اضافه می شود. این آنزیم یک واکنش رنگ سنجی را کاتالیز می کند که سیگنالی متناسب با مقدار آنتی ژن موجود در نمونه تولید می کند.

روش ساندویچ الایزا

ساندویچ الایزا روش محبوب دیگری است که به ویژه برای تشخیص آنتی ژن هایی با اپی توپ های متعدد مفید است. در این روش آنتی بادی جذب شده روی سطح جامد تثبیت می شود و نمونه حاوی آنتی ژن اضافه می شود.

پس از شستن هر گونه آنتی ژن غیر متصل، یک آنتی بادی شناسایی مرتبط با یک آنزیم اضافه می شود و یک “ساندویچ” با آنتی ژن تشکیل می دهد. آنزیم یک واکنش رنگ سنجی را کاتالیز می کند و سیگنالی متناسب با مقدار آنتی ژن موجود در نمونه تولید می کند.

روش الایزا رقابتی

ELISA رقابتی برای اندازه گیری غلظت مولکول های کوچک یا هاپتن ها در یک نمونه استفاده می شود. در این روش آنتی ژن مورد نظر روی یک سطح جامد تثبیت می شود. و مقدار مشخصی از آنتی ژن نشاندار شده برای رقابت با آنتی ژن نشاندار نشده در نمونه اضافه می شود. پس از شستن هر گونه آنتی ژن غیر متصل، مقدار آنتی ژن نشاندار متصل به سطح با غلظت آنتی ژن نشاندار نشده در نمونه نسبت معکوس دارد.

روش الایزا مستقیم

ELISA مستقیم یک روش ساده و سرراست است که برای تشخیص آنتی ژن ها یا آنتی بادی ها بدون نیاز به آنتی بادی های ثانویه استفاده می شود. در این روش آنتی ژن روی یک سطح جامد تثبیت می شود و یک آنتی بادی اولیه مخصوص آنتی ژن اضافه می شود. آنتی بادی اولیه مستقیماً به یک آنزیم متصل می شود که یک واکنش رنگ سنجی را کاتالیز می کند تا سیگنالی متناسب با مقدار آنتی ژن موجود در نمونه تولید کند.

علاوه بر این روش‌های سنتی الایزا، تغییراتی مانند الایزای کمی، الایزای چندگانه، و الایزای فاز معکوس نیز وجود دارد که حساسیت. ویژگی و توان عملیاتی را برای کاربردهای مختلف تحقیقاتی افزایش می‌دهد.

در نتیجه، ELISA یک ابزار همه کاره و قدرتمند برای تشخیص و تعیین کمیت پروتئین ها، آنتی بادی ها و سایر مولکول ها در نمونه های بیولوژیکی است.

با درک روش های مختلف ELISA موجود و انتخاب مناسب ترین روش برای نیازهای تحقیقاتی خود. می توانید نتایج دقیق و قابل اعتمادی را برای آزمایش های خود به دست آورید.