کیت استخراج اگزوزوم از محیط کشت (اگزوسیب Exocib C)، محصول Cib Biotech

برای مشاهده مقالات چاپ شده با این کیت، کلمه “EXOCIB” را در google scholar جستجو کنید.

مقدمه

اگزوزوم‌ ها انواعی از وزیکول های خارج سلولی کوچک (با قطر ۱۵۰-۳۰ نانومتر/در ابعاد نانو) هستندکه تقریبا توسط تمام سلول‌ ها تولید شده و به فضای خارج سلولی ترشح می‌ شوند. اگزوزوم‌ ها برخلاف سایر انواع وزیکول‌ های خارج سلولی (میکرو وزیکول‌ها MVs) و اجسام آپاپتوتیک (Apoptotic Bodies) از مسیر اندوزومال تشکیل می شوند. اگزوزوم‌ ها دارای غشا دو لایه فسفولیپیدی با توپولوژی مشابه غشا سلولی و محتوی لیپید، پروتئین و قطعات ژنتیکی از جمله DNA و انواع RNA هستند، بخشی از محتویات اگزوزوم پروتئین‌ هایی هستند که در روند ساخت آن دخیل می‌ باشند و بعضا به عنوان مارکر شناسایی اگزوزوم به کار گرفته می‌ شوند، بخش قابل توجه دیگر محموله اگزوزوم، بازتابی از وضعیت بیولوژیک سلول والد است که سبب تمایز اگزوزوم‌ های ترشح شده از سلول‌ های مختلف می‌ شود.

اگزوزوم ها به واسطه داشتن ماکرومولکول‌ های فعال و توانایی ترشح و الحاق به سلول‌ های دیگر نقش مهمی را در فرایندهای مختلف زیستی از جمله پاسخ ایمنی، آنژویوژنز، التهاب، ترمیم، مرگ سلولی و… ایفا می‌ کنند.

کاربردهای اگزوزوم

اگزوزوم به علت اینکه نشانگر خلاصه‌ ای از وضعیت سلول است و می‌ تواند حاوی بیومارکرهای بیماری‌ ها باشد در حوزه تشخیص diagnosis و پروگنوز prognosis و همچنین مانیتور کردن پاسخ بیماران به درمان مورد توجه است. همچنین به علت خواص ویژه‌ ای مانند سازگاری زیستی و… در طراحی واکسن‌ ها و سیستم‌ های دارورسانی Drug Delivery systems و درمان انواع بیماری‌ ها به خصوص سرطان، بیماری‌ه ای نورودژنراتیو و بیماری‌ های قلبی عروقی تحت مطالعه هستند و در جهت القای پاسخ ایمنی اختصاصی، ترمیم، جلوگیری از عوارض بیماری‌ها و… مورد استفاده قرار گرفته‌ اند.

روش‌ های استخراج اگزوزوم

تا کنون از روش های متنوعی برای استخراج اگزوزوم استفاده شده است؛ سانتریفوژ با دور بالا، اولترافیلتراسیون، ستون کروماتوگرافی، ایمونوکپچر، از جمله روش‌ های شناخته شده استخراج اگزوزوم هستند.
اما روش‌ های فوق با مشکلاتی از جمله عدم دسترسی به تجهیزات و مواد گران قیمت آزمایشگاهی مورد نیاز، پیچیدگی روند تخلیص و… رو به رو هستند، همچنین مقدار و خلوص پایین اگزوزوم استخراج شده، ایجاد اختلال در عملکرد بیولوژیک اگزوزوم، محدودیت حجم نمونه و … از جمله موانع استفاده از این روش‌ ها محسوب می‌ شود.
کیت اگزوسیب بر اساس روش رسوب‌دهی، اگزوزوم‌ ها را از نمونه جدا می‌ کند، که علاوه بر سادگی پروتکل، نیازی به مواد و تجهیزات گران قیمتی مانند آنتی‌بادی‌ های استفاده شده در ایمونوکپچر و سانتریفوژ دور بالا ندارد و برای حجم نمونه بالا نیز به راحتی قابل استفاده است، افزون بر این مطالعات نشان داده است اگزوزوم‌ های جداسازی شده با این روش، از نظر فاکتورهای ظاهری و بیومارکرهای سطحی با اگزوزوم‌ های استخراج شده به روش های اولتراسانتریفوژ و اولترافیلتراسیون تفاوتی نداشته و از نظر حفظ فعالیت بیولوژیک اگزوزوم بر آن‌ ها ارجحیت دارد و بیشترین مقدار miRNA و کمترین آلودگی پروتئینی را در این روش شاهد بوده‌اند.