نقد و بررسی
محیط کشت پودری SDA یا سابورو دکستروز آگار (Sabouraud Dextrose Agar) ایبرسکومحیط کشت میکروبی Sabouraud Dextrose Agar به صورت پودر، محصول ایبرسکو
Sabouraud-Dextrose 2% Agar
کاربرد: محیطی اسیدی برای کشت مخمر، کپک و قارچ خصوصاً درماتوفیت ها
استاندارد ها: APHA, BAM, USP, EP, ISIRI 2326
آماده سازی محیط
1- 65 گرم از محیط را در 1 لیتر آب مقطر حل کنید.
2- بجوشانید تا کاملاً حل شود.
3- در دمای 121 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه اتوکلاو کنید.
4- در صورت تمایل به افزودن کلرامفنیکل یا هر آنتی بیوتیک دیگری، پس از خنک شدن محیط و رسیدن دمای آن به 45 الی 50 درجه سانتیگراد، آن را به محیط اضافه کنید.
ترکیبات (گرم در لیتر):
Peptone 10.0
Dextrose 40.0
Agar 15.0
pH نهایی محیط در دمای 25 درجه = 0.2±5.6
فرآیند آزمایش:
– نمونه مورد نظر را بر روی پلیت کشت دهید.
– پلیت ها را در دمای 2±25 درجه به مدت 3 الی 5 روز (برای قارچ ها در صورت لزوم تا 3 هفته) گرماگذاری کنید.
کنترل کیفی
– ظاهر محیط دهیدراته: کرم تا زرد رنگ، یکنواخت و پودری
– ظاهر محیط آماده: محلول شفاف زرد رنگ، با رسوب بسیار کم
– نتیجه کشت باکتری در شرایط بی هوازی پس از گرماگذاری در دمای 26 الی 28 درجه تا 7 روز:
سوش استاندارد | ATCC | رشد |
candida albicans | 10231 | خوب |
aspergillus brarsilinesis (niger) | 16404 | خوب |
saccharomyces cerevisiae | 9763 | خوب |
نتیجه و تفسیر:
– پس از گرماگذاری، کلنی های قارچ را از نظر شکل ظاهری کلنی ها، خصوصیات میکروسکوپی، سرعت رشد و منبع نمونه کشت شده بررسی کنید.
– مخمر ها توسط بسیاری از تست های بیوشیمیایی تشخیص داده می شود.
– تعداد کلنی های نمونه های پورپلیت شده یا اسپیرید شده را شمارش کنید و تعداد آن ها را به صورت تعداد CFU در هر میلی لیتر یا هر گرم نمونه محاسبه کنید.
– برای بررسی بیشتر، کلنی ها را بر روی محیط مناسب آن کشت دهید.
نکات:
- امکان دارد pH اسیدی محیط و یا افزودن آنتی بیوتیک به محیط، مانع رشد برخی قارچ ها در آن شود.
- به دلیل تنوع نیازهای غذایی، ممکن است برخی سویه ها در این محیط رشد نکنند و یا رشد خوبی نداشته باشند.
- محیط را بیش از حد حرارت ندهید زیرا به دلیل اسیدی بودن pH، آگار آن نرم می شود.
- برخی قارچ های بیماریزا ممکن است اسپورهای عفونی تولید کنند که به راحتی در محیط پراکنده می شوند. در چنین مواقعی بهتر است آزمایش در زیر هود آزمایشگاهی انجام شود.
شرایط نگهداری
پودر محیط سابورو دکستروز آگار، داخل قوطی کاملا در بسته و در دمای پایین تر از 30 درجه، و محیط آماده در دمای بین 2 تا 8 درجه نگهداری شود. بهترین زمان استفاده تا قبل از تاریخ انقضای درج شده بر روی برچسب محصول است.
هنوز بررسیای ثبت نشده است.