نقد و بررسی
محیط کشت میکروبی TSI آگار (Triple Sugar Iron) به صورت پودر محصول ایبرسکومحیط کشت میکروبی TSI آگار، تی اس آی آگار یا TRIPLE SUGAR IRON AGAR به صورت پودر محصول ایبرسکو
کاربرد: محیطی انتخابی برای افتراق میان باکتری های خانواده انتروباکتریاسه براساس توانایی تخمیر قندهای گلوکز، لاکتوز و سوکوروز و تولید سولفید هیدروژن
استاندارد ها: USP, BAM, ISO, APHA
آماده سازی محیط کشت میکروبی TSI آگار
1- 65 گرم از پودر محیط را در یک لیتر آب مقطر حل کنید. به آرامی حرارت دهید تا محیط کاملاً حل شود.
2- محیط کشت حرارت دیده را داخل لوله های درپیچ دار ریخته و در دمای 121 درجه به مدت 15 دقیقه اتوکلاو کنید.
3- لوله های را به حالت شیبدار (اسلنت) قرار داده و صبر کنید تا محیط ببندد.
ترکیبات محیط کشت میکروبی TSI آگار (گرم در لیتر):
peptone from casein 15.0
peptone from meat 5.0
meat extract 3.0
yeast extract 3.0
sodium chloride 5.0
lactose 10.0
sucrose 10.0
dextrose 1.0
ammonium iron (III) citrate 0.5
sodium thiosulfate 0.5
phenol red 0.024
agar 12.0
pH نهایی محیط در 25 درجه = 0.2±7.4
فرآیند آزمایش:
1- محیط کشت TSI را مطابق با دستورالعمل گفته شده در لوله تهیه کنید.
2- نمونه مورد نظر را بصورت سطحی و عمقی در لوله کشت دهید.
3- درب لوله ها را بصورت نیمه باز بسته و در دمای 2±35 درجه به مدت 18 الی 24 ساعت در شرایط هوازی گرما گذاری کنید.
کنترل کیفی:
ظاهر پودر: پودری و یکنواخت، صورتی رنگ
ظاهر محیط آماده: قرمز رنگ و کمی کدر
نتیجه کشت باکتری در شرایط هوازی پس از گرماگذاری در دمای 2±35 درجه به مدت 18 الی 24 ساعت:
| سوش استاندارد | ATCC | رشد | واکنش در قسمت سطح شیبدار | واکنش در قسمت عمقی | تولید گاز | تولید H2S |
| Escherchia coli | 25922 | خوب | اسیدی | اسیدی | + | – |
| Psedumonas aeruginosa | 9027 | خوب | قلیایی | قلیایی | – | – |
| Salmonella enterica subsp. entericaserotype enteritidis | 13076 | خوب | قلیایی | اسیدی | + | + |
| Shigella flexneri | 12022 | خوب | قلیایی | اسیدی | – | – |
| Escherchia coli | 25922 | خوب | اسیدی | اسیدی | + | – |
| Psedomonas aeruginosa | 9027 | خوب | قلیایی | قلیایی | – | – |
نتیجه و تفسیر:
- پس از دوره گرما گذاری، واکنش نمونه های مجهول را با سوش های استاندارد مقایسه کنید.
- واکنش تخمیر قند در این محیط با زرد شدن رنگ محیط مشخص می شود. چنانچه قسمت انتهایی محیط کشت زرد شود (واکنش اسیدی) ولی قسمت شیبدار محیط قرمز شود (واکنش قلیایی)، نشان دهنده این است که باکتری فقط قادر به تخمیر گلوکز می باشد.
- چنانچه کل محیط کشت در لوله زرد شده باشد به این معنی است که باکتری قادر به تخمیر گلوکز، لاکتوز و یا سوکروز می باشد.
- در صورتی که کل محیط کشت در حالت قرمز رنگ باقی بماند، نشان دهنده وجود باکتری غیر تخمیر کننده قند خواهد بود.
- تولید هیدروژن سولفید در این محیط با سیاه رنگ شدن انتهای محیط کشت در لوله نمایان شده و تولید گاز با بالا آمدن محیط کشت و یا ترک خوردن آن مشخص می شود.
شرایط نگهداری
پودر محیط، داخل قوطی کاملا در بسته و در دمای پایین تر از 30 درجه، و محیط آماده در دمای بین 2 تا 8 درجه نگهداری شود. بهترین زمان استفاده تا قبل از تاریخ انقضای درج شده بر روی برچسب محصول است.
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.